inestigacion No. 5

Salmonelosis:
Los signos y síntomas de una infección por salmonela aparecen generalmente 12 a 72 horas después de que los microbios entran en su cuerpo. Usted puede tener cualquiera de lo siguiente:• Dolor tipo cólico en el abdomen (estómago).
•Diarrea (evacuaciones flojas) que pueden tener
sangre.
•Fiebre o dolor de cabeza.
•Náusea (malestar estomacal) o vomito (devolver).
•Pérdida de peso o deshidratación (perder demasiado líquido)

Tifoidea:
La fiebre tifoidea esta caracterizada por fiebre alta constante (40º), sudoración profusa, gastroenteritis y diarrea. Menos comúnmente puede aparecer un sarpullido de manchas aplanadas de color rosáceo. Tradicionalmente se divide en cuatro fases, durando cada una de ellas una semana aproximadamente.Primera semana: Durante esta fase sube lentamente la temperatura con una bradicardia relativa, malestar general, dolor de cabeza y tos. Se ha observado Epistaxis en una cuarta parte de los casos. Hay leucopenia con eosinopenia y linfocitosis relativa.Segunda semana: Durante esta fase se produce la postración. Llegando la fiebre al culmen de los 40º C. Hay bradicardia con un pulso dicrótico. El delirio es frecuente (este delirio le da a la Fiebre Tifoidea el nombre de fiebre nerviosa). En un tercio de los pacientes se han observado puntos rojos en la parte inferior del pecho y abdomen. Hay respiración agitada. El abdomen esta distendido y dolorido en cuadrante derecho inferior. La diarrea puede también ocurrir en esta fase (6 - 8 deposiciones por día), de apariencia verde y olor característico con apariencia de puré de guisantes. No obstante el estreñimiento también es frecuente. El Bazo e hígado están inflamados con un aumento del nivel de transaminasas.Tercera semana: En esta semana si la fiebre tifoidea no se trata, las complicaciones son frecuentes: Hemorragias Intestinales debidas a la congestión de las Placas de Peyer (serias pero no necesariamente mortales); Perforación intestinal en el Íleon que puede dar lugar a peritonitis abscesos que pueden derivar en encefalitis, colecistitis, y endocarditis. La fiebre es alta.Finales de Tercera semana/Principios de la cuarta: La temperatura corporal se va restableciendo, pero el debilibitamiento aun persiste

Brucelosis:
Sintomatología inicial es fiebre, cefalea, dolor vertebral con afectación de las articulaciones sacroilíacas y adenopatías (inflamación de los ganglios) en el 50% de los afectados. En casos más graves puede producir endocarditis y neumonía. La fiebre suele subir durante la noche y disminuir durante el día, con períodos de oscilación (de ahí que se dé el nombre de fiebre ondulante a la enfermedad).

practica 8

meterial practica 8 !!
AglutinaciónMateriales
1.-Lámina de cristal para reacciones febriles
2.-Tubo de ensaye con tapón rojo estéril
3.-Palillos de madera 2 o 3 por cada uno
4.-Torundas de algodón
5.- Centrifuga
6.- Microscopio
7.-Pipeta Pasteur con lóbulo
8.- Papel secante
9.- Papel para mesa de laboratorio
10.- Torniquete
11.-GradillasReactivosFebriclinHO AB Bruc. Proteus 0x19º º
º º“Paciente” “sangre fresca”
Hoja de solicitud de examen Solicitud para examen de laboratorioIndicaciones del laboratorio para el paciente
Folio del registro“Inmunología” (portada del libro) con 3 bacterias:Salmonella, Brucella y ProteusAnalítica
1.- Técnica de extracción de sangre(Venopunción)
2.- separación del paquete sanguíneo y plasma
3.-Punteo de plasma en placa de cristal
4.-Mezclar plasma con reactivo de Febriclin para observar la reacción de aglutinación
5.-Observar macroscópicamente la laminilla a tras luz
6.-observar microscópicamente el proceso de aglutinación en objetivo 10x y 40x
7.-Reportamos en hoja de laboratorio:
Nombre del laboratorio, dirección, datos del paciente: nombre, edad, peso
Para Dr.
Tífico H= +- (positivo o negativo)
Tífico O= +-
Paratífico A=+-B
Brucella abortus= +-
Proteus 0x19 =+-

practica 9

material practica 9
Pre analíticaMateriales:
1.-Tubo de ensaye con tapón morado
2.-Placa de porcelana excavada
3.-Wiltrobe
4.-Vasal
5.-Centrifuga
6.-Pipeta Pasteur y lóbulo
7.-Palillos de madera
8.- Torundas de algodón alcoholizadas
9.-microcentrifuga
10.-papel secante y para mesa de laboratorio
11.- GradillasReactivos:
1.- Tipificadores A, b, d
Tipo sanguíneo
Prueba de aglutinación en sangre (objetivo)

frotis

Un frotis de sangre es un proceso científico que consiste en el extendido de una gota de sangre en la superficie de un portaobjetos o de un cubreobjetos, con el fin de analizarla posteriormente.
Es más adecuado emplear sangre que aun no ha estado en contacto con el anticoagulante, pues este podría alterar los resultados (algunos anticoagulantes tienden a deformar las células de la sangre).
Su realización es de vital importancia para obtener una orientación de:
1. La valoración de la estimulación eritropoyetica.
2. Las anomalías en la maduración nuclear y citoplásmica de las células hemáticas.
3. Los trastornos en la arquitectura de las células al formarse en la médula osea.
4. Las alteraciones singulares en la forma de las células, que son una identificación especifica de algunas enfermedades.
5. Algún indicador de los efectos nocivos de la quimioterapia y de la radioterapia.
6. La diferenciación y recuento de los elementos celulares de la sangre.
La fidelidad de la información obtenida de ellos, depende en gran parte de la calidad de las extensiones. Estas no deben ser demasiado gruesas porque las células se amontonarían y no podrían ser reconocidas, ni diferenciarse, ni demasiado delgadas porque las células se deformarían, distorsionarían y destruirían. Por eso los frotis de sangre deben ser bien nivelados y para obtener buenos resultados es necesario que:
1. Tanto portaobjetos como cubreobjetos deben estar bien limpios y desengrasados (prefentemente nuevos).
2. La gota de sangre usada para la preparación de el frotis no debe ser muy grande ni pequeña, de preferencia de el tamaño de la cabeza de un alfiler (entre 2 y 3 mm), obtenida por punción capilar.
3. La sangre no haya estado en contacto con anticoagulante, pues podría deformarse la morfología celular si pasase esto.
4. La lectura de las extensiones se hará en las zonas donde los eritrocitos "casi se tocan".

bacilos

Los bacilos son bacterias que tienen forma de bastón, cuando se observan al microscopio.

Los bacilos se suelen dividir en:
Bacilos Gram. Positivos: En microbiología, se denominan bacterias Gram. positivas a aquellas bacterias que se tiñen de azul oscuro o violeta por la tinción de Gram.: de aquí el nombre de "Gram.-positivas" o también "grampositivas".[1] Esta característica está íntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular por lo que refleja un tipo natural de organización bacteriana. Son uno de los principales grupos de bacterias, y cuando se tratan como taxón se utiliza también el nombre de Posibacteria.[2] Las restantes son las bacterias Gram negativas.

Bacilos Gram negativos: En microbiología, se denominan bacterias Gram. negativas a aquellas bacterias que no se tiñen de azul oscuro o violeta por la tinción de Gram.: de ahí el nombre de "Gram.-negativas" o también "gramnegativas".[1] Esta característica está íntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular, por lo que refleja un tipo natural de organización bacteriana. Son uno de los principales grupos de bacterias y cuando se tratan como taxón se utiliza también el nombre de Negibacteria.[2] Las restantes son las bacterias Gram positivas.

cocos

Coco, tipo morfológico de bacteria. Tiene forma más o menos esférica (ninguna de sus dimensiones predomina claramente sobre las otras).

• Diplococo: estos cocos se dividen en un sólo plano formando parejas, y dan la impresión de un grano de café, entre éstos podemos citar a los meningococos y gonococos.

Algunos ocasionan enfermedades a los humanos (Ej.: neumococo y estafilococo) también es causante de enfermedades como el de la meningitis, otros resultan inocuos o incluso beneficiosos.

Los cocos se dividen en:

• Diplococos: Son pares.
• Estreptococos: En cadena.
• Estafilococos: En racimo.
• Tétradas: En número de 4.
• Sarcinas: En paquetes.

paramecio

Los paramecium

Son protozoos ciliados con forma de suela se zapato, habituales en aguas dulces estancadas con abundante materia orgánica como charcos y estanques.
El tamaño ordinario de todas las especies de paramecios es de apenas 0’05mm.
Como muchos otros microorganismos, los paramecios se reproducen asexualmente por fisión binaria, se alimentan de bacterias y otros microorganismos microscópicos y para atraparlos utilizan una boca en forma de ranura.

-Características de los siguientes microorganismos pertenecientes al grupo de las enterobacterias:

Escherichia Coli: Organismo procarionte, que trata de un bacteria que se encuentra generalmente en los intestinos animales y por ende en las aguas negras. Principal organismos anaerobio facultativo del sistema digestivo.
La bacteria no adquiere elementos genéticos que codifican factores virulentos. La Escherichia coli O157:H7 es una de cientos de cepas de la E. coli. Aunque la mayoría de las cepas son inocuas y viven en los intestinos de los seres humanos y animales saludables, esta cepa produce una potente toxina y puede ocasionar enfermedades graves como el Síndrome urémico hemolitico.

Salmonella: Es un género de bacteria que pertenece a la familia Enterobacteriaceae, formado por bacilos gramnegativos, anaerobios facultativos, con flagelos perítricos y que no desarrollan cápsula ni esporas. Son bacterias móviles que producen sulfuro de hidrógeno (H2S). Fermentan glucosa por poseer una enzima especializada, pero no lactosa, y no producen ureasa.
Es un agente zoonótico de distribución universal. Se transmite por contacto directo o contaminación cruzada durante la manipulación, en el procesado de alimentos o en el hogar, también por vía sexual.
Algunas salmonellas son comunes en la piel de tortugas y de muchos reptiles, lo cual puede ser importante cuando se manipulan a la vez este tipo de mascotas y alimentos.

Proteus: es un genero de bacterias gramnegativas, que incluye patógenos responsables de muchas infecciones del tracto urinario. Las especies de Proteus normalmente no fermentan lactosa por razón de tener una β galactosidasa, pero algunas se han mostrado capaces de hacerlo en el test TSI (Triple Sugar Iron). Son oxidasa-negativas y ureasa-positivas. Algunas especies son mótiles. Tienden a ser organismos pleomórficos, no esporulados ni capsulados y son productoras de fenilalanina desaminasa. Con la excepción de P. mirabilis, todos los Proteus reaccionan negativos con la prueba del indol .
Brucella abortus: es una bacteria Gram negativa con un lipopolisacárido (LPS) fuertemente inmunodominante, el que junto con la capacidad de sobrevivir en el interior de células fagocíticas constituyen sus principales factores de virulencia. La infección en humanos conduce a una enfermedad con tendencia a la cronicidad, con fiebre y malestar recurrentes que deterioran su calidad de vida y que además puede presentar complicaciones como artritis, meningitis, entre otras.
En el ganado bovino la bacteria se ubica en la placenta y órganos reproductores por su afinidad por el eritritol. La respuesta inmune frente a B. abortus, patógeno intracelular facultativo, depende principalmente de la activación de la inmunidad mediada por células, con la participación de células T CD4+ de tipo Th1, que secretan interferón gama (INF-γ), citoquina que estimula tanto la actividad bactericida de macrófagos como la actividad citotóxica de los linfocitos T CD8+. Estos últimos son capaces entonces de destruir células infectadas con Brucella.

BACTERIAS ACTIVAS DENTRO DE MEDIO DE CULTIVO HABILITADO

Cuando se desea cultivar bacterias, es necesario tomar en cuenta los componentes nutritivos, sales, humedad y las condiciones físicas como lo son el PH, la luz y temperatura. Una bacteria puede alterar el PH del medio de cultivo como resultado de la degradación de sustancias producidas por la propia bacteria.
Por otro lado las bacterias en su conjunto presentan una respuesta variable al oxígeno libre clasificandose en cnco grupos:
* Aerobicos...Bacterias que crecen en presencia de oxígen libre.
* Anaerobicos...Bacterias que crecen en ausencia de oxígeno libre.
* Anaerobios...Facultativas, bacterias que crecen en presencia como en ausencia de oxígeno libre.
* Aerotolerantes...Bacterias que pueden tolerar el oxígeno y crecen en su presencia aun cuando no lo utilizan.
* Micro aerofilas...Bacterias que crecen en presencia de pequeñas cantidades de O libre.

moleculas inorganicas

Se denomina compuesto inorgánico a todos aquellos compuestos que están formados por distintos elementos pero en los que su componente principal no siempre es el carbono, siendo el agua el más importante.Entre los compuestos inorgánicos más importantes de los seres vivos tenemos el agua y las sales minerales que abundan en el suelo, y el dióxido de carbono, el cual exhalamos nosotros cuando respiramos.-Moléculas inorgánicas: Agua, sales minerales y gases.-Ejemplos de compuestos inorgánicos:-Cloruro de sodio- Agua- Amoniaco- Dióxido de Carbono-El cloruro: Es necesario para la elaboracion del acido clorhídrico del tejido gástrico.-Sodio: Interviene en la regulación del balanceo hídrico favoreciendo la retención de agua.-Potasio: Actúa en el balanceo hídrico favoreciendo la eliminación de agua.-Yodo: Necesario para que la glándula tiroides elabore la secreción hormonal que regula el metabolismo.-Hierro: Imprensindible para la formación de la hemorragia de los glóbulos rojos.-Calcio y fósforo: Constituyen la parte inorgánica de los huesos-CO2: Fundamental para el proceso de la fotosíntesis.

pipetas ( :

practica de pipeteo

Objetivo
En esta práctica es la número tres y se realizará con el fin de aprender las pipetas graduadas volumétricas que ya conocemos, a manejarlas debidamente.
La medición de líquidos se realizará tomando desde 1ml hasta 5 ml. También utilizaremos una pipeta automática que mide en microlitros. Se tomará en la probeta para verificar que esta correcta la medida. Se compararan las gotas de todas las pipetas sobre una caja de Petri y todos los integrantes de la mesa deberán realizar el pipeteo.

Introducción
La práctica de pipeteo consistirá, en que tomemos todas las pipetas graduadas volumétricas y las llevemos a la mesa de trabajo, las tomaremos de una por una y uno por uno cada integrante del equipo deberá de realizar el pipeteo desde 1 ml hasta 5 ml, deberemos manejarlas con mucho cuidado.
La pipeta Pasteur no la manejaremos igual que las otras ya que esta, cuenta con un lóbulo de extracción, que es el que utilizaremos para succionar el agua. La pipeta automática se maneja con microlitros, mientras que el resto de las pipetas debes succionar el agua con la boca.
Depositaremos el agua en la probeta y checaremos que coincidan las medidas, así nos daremos cuenta si lo hicimos bien.



INDICE
1. Objetivo
2. Introducción
3. Marco teórico
*Dibujos
*Notas
*Bitácora
* Observaciones personales
4. Conclusión
5. Ficha Bibliográfica


Marco TEORICO


Materiales:
Probeta graduada 25 ml
Probeta graduada 100 ml
Matraz Erlenmeyer 250 ml
Pipeta Pasteur y lóbulo de extracción
Pipeta graduada 10 ml
Pipeta automática
Pipeta volumétrica 5 ml
Pipeta volumétrica 1 ml


Procedimiento:
Cada uno de los integrantes realizará la misma actividad, con las 5 pipetas entregadas y colocará la muestra de líquido en la probeta, se pipetearán desde 1 ml hasta 5 ml. Una vez hecho eso se colocara una gota de cada pipeta en una caja de Petri y se compararán sus tamaños.


Notas:
Pipeta Pasteur se aprieta se aprieta el lóbulo para succionar el agua contenida en el matraz Erlenmeyer hacia la probeta, al utilizarla 5 veces se llego a los 3 ml.

Pipeta volumétrica 1 ml
Se succiona el agua con la boca, después lo colocamos en la probeta graduada y lo comprobamos que aspiramos realmente 1 ml de agua.

Pipeta Volumétrica (5 ml)
Se succiona con la boca, sostenemos con el menisco, soltamos y ponemos el agua en la probeta comprobando que si son 5 ml exactos.

Pipeta graduada 10 ml
Se aspira el agua, de igual modo sostenemos con el menisco hasta el 10, luego colocamos el líquido en la probeta donde comprobamos que son 10 ml.

Comparación de gotas

1. Pipeta Pasteur (gota mas pequeña)
2. Pipeta automática en 10 µl ( gota mediana pequeña)
3. Pipeta graduada de 1 ml (gota mediana)
4. Pipeta volumétrica 5 ml (gota mediana grande)
5. Pipeta graduada 10 ml (Grande)


Bitácora

Tiempo Actividad
5 min Colocación del equipo de bioseguridad
10 min. Explicación del Profr.
10 min Apuntes
1 hora Desarrollo de la práctica
5 min Retirar equipo de bioseguridad



Observaciones personales

Al principio creímos que no nos daba la medida exacta, sin embargo estábamos equivocados, pues medimos mal al vaciar el líquido de la pipeta a la probeta.
Batallamos un poco con el pulso, al colocar las gotas de agua en la caja de Petri.

CONCLUSION
La práctica fue una buena experiencia, y a pesar de que estaba sencilla, la verdad es que sí batallamos. Al final lo logramos, pudimos succionar el agua y vaciarla en la probeta obteniendo la cantidad deseada.
Al colocar las gotas sobre la caja Petri de las diferentes pipetas, yo coloque la de la pipeta Pasteur y me pareció que logre controlar mejor mi pulso.
Se tiene que tener mucha determinación y destreza para pipetear.

investigacion de pie de rey

El pie de rey, también denominado cartabón de corredera, calibre, pie de metro, pie a coliza o Vernier, es un instrumento para medir dimensiones de objetos relativamente pequeños, desde centímetros hasta fracciones de milímetros (1/10 de milímetro, 1/20 de milímetro, 1/50 de milímetro). En la escala de las pulgadas tiene divisiones equivalentes a 1/16 de pulgada, y, en su nonio, de 1/128 de pulgadas.

Es un instrumento sumamente delicado y debe maniobrarse con habilidad, cuidado y delicadeza, con precaución de no rayarlo ni doblarlo (en especial, la coliza de profundidad).

Consta de una "regla" con una escuadra en un extremo, sobre la cual se desliza otra destinada a indicar la medida en una escala. Permite apreciar longitudes de 1/10, 1/20 y 1/50 de milímetro utilizando el nonio. Mediante piezas especiales en la parte superior y en su extremo, permite medir dimensiones internas y profundidades. Posee dos escalas: la inferior milimétrica y la superior en pulgadas

pie de rey

cuestionario PIE DE REY

Cuestionario: 1 Segunda unidad.
1.- Es un instrumento para medir dimensiones de objetos relativamente pequeños, Se atribuye al cosmógrafo y matemático portugués que se llama:
R=Pedro Núñez
2.- En qué año se le atribuye el pie de rey al cosmógrafo y matemático portugués.
3.- También se ha llamado pie de rey al:
R= Pie de vernier
4.- En que año se le atribuye el pie de rey al geómetra Pedro Vernier.
R= 1631
5.- ¿Qué otro nombre recibe el origen del pie de rey?
R=Vernier
:::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::
R: Nombre: Pie de rey_______________________________________

En los recuadros siguientes ponga el número y nombre correspondiente de la figura de medición
1 Mordazas para medidas externas
2 Mordazas para medidas internas
3 Coliza para medida de profundidades
4 Escala con divisiones en cm y mm
5 Escala con divisiones en pulgada y fracciones de pulgada
6 Nonio para la lectura de las fracciones de milímetros en que esta dividido
7 Nonio para la lectura de las fracciones de pulgada en que esta dividido
8 Botón de deslizamiento y freno










Descripción del Pie de Rey o Vernier. 121 palabras utilizaras para su descripción.

Consta de una "regla" con una escuadra en un extremo, sobre la cual se desliza otra destinada a indicar la medida en una escala. Permite apreciar longitudes de 1/10, 1/20 y 1/50 de milímetro utilizando el nonio. Mediante piezas especiales en la parte superior y en su extremo, permite medir dimensiones internas y profundidades. Posee dos escalas: la inferior milimétrica y la superior en pulgadas. Mordazas para medidas externas. Mordazas para medidas internas. Coliza para medida de profundidades. Escala con divisiones en centímetros y milímetros. Escala con divisiones en pulgadas y fracciones de pulgada. Nonio para la lectura de las fracciones de milímetros en que esté dividido. Nonio para la lectura de las fracciones de pulgada en que esté dividido. Botón de deslizamiento y freno.

Salmonella, Brucella y Proteus 0x19

Salmonella es un género de bacteria que pertenece a la familia Enterobacteriaceae, formado por bacilos gramnegativos, anaerobios facultativos, con flagelos perítricos y que no desarrollan cápsula ni esporas. Su tamaño oscila entre 1 y 3 mm de longitud y entre 0.5 y 0.7 mm de diámetro.
El género Salmonella es de taxonomía difícil, modificada en estos últimos años por el aporte de estudios moleculares de homología de ADN que han clarificado el panorama taxonómico de las enterobacterias.
El tratamiento taxonómico actual de Salmonella ha simplificado el espectro, reagrupando todas las cepas (patógenas o no) en dos únicas especies: S. enterica y S. bongori. Ésta última (previamente subespecie V) no es patógena para el ser humano.
La especie S. enterica tiene seis subespecies (a veces presentadas como subgrupos bajo numeración romana):
• I enterica
• II salamae
• IIIa arizonae
• IIIb diarizonae
• IV houtenae
• V S. bongori, ya incluida en una especie distinta
• VI indica
Con importancia clínico epidemiológica, las más de 2000 serovariedades de Salmonella pueden agruparse en tres divisiones ecológicas (spp. son subespecies):
1. Salmonella spp. adaptadas a vivir en el ser humano, entre ellas, S. typhi, S. paratyphi A, B y C;
2. Salmonella spp. adaptadas a hospederos no humanos, que circunstancialmente pueden producir infección en el hombre, entre ellas, S. dublin y S. cholerae-suis;
3. Salmonella spp. sin adaptación específica de hospedero, que incluye a unas 1800 serovariedades de amplia distribución en la naturaleza, las cuales causan la mayoría de las salmonelosis en el mundo.

Brucella
Es un género de bacterias Gram negativas. Son cocobacilos pequeños (0,5-0,7 por 0.6-1.5 µm), no-móviles y encapsulados.
Tipos de Brucella
-B. melitensis. Infecta cabras y ovejas
-B. abortus. Infecta vacas
-B. suis. Infecta cerdos
-B. ovis, infecta ovejas
-B. neotomae
-B. pinnipediae. Infecta mamíferos marinos.

Proteus 0x19
Género de bacterias Gramnegativas, que incluye patógenos responsables de muchas infecciones del tracto urinario. Las especies de Proteus normalmente no fermentan lactosa por razón de tener una B. galactosidasa, son: oxidasa-negativas y ureasa- positivo.
Es un género de bacteria ubicuos, residentes del tracto intestinal del hombre y otros animales.
(Taxonomía) se clasifican en 3:
P. Vulgaris
P. Mirabilis
P. Penneri

peso y medida segunda practica

OBJETIVO
Pesar y medir todos los materiales de cristalería en la mesa, vaso de precipitados, pipetas, vidrio de reloj, laminilla para reacciones inmunológicas, cristalizador entre otros.
Así como las sustancias solicitadas (sal, azúcar y agua destilada). Con el fin de utilizar la balanza granataria y conocer el peso propio del objeto y con el reactivo.


INTRODUCCION
En esta práctica se aprenderá a utilizar la balanza granataria, el propósito principal será el de conocer los pesos y medidas de todos los materiales de cristalería, para que cuando se nos solicite la cantidad en gr de cualquier sustancia, sepamos cuanto va a ser sumándole el peso de ese material. Y con eso estaremos utilizando operaciones básicas y nuestro sistema métrico decimal.
Así por ejemplo si un vaso de precipitados de 50 ml pesa 58 gr y el azúcar pesa 25.2 gr, ambos darán un peso de 53.2 gr.
Esto es la base de muchas otras cosas que aprenderemos después.

INDICE
1. Objetivo
2. Introducción
3. Marco teórico
*Notas
* Dibujos
*Bitácora
* Recuadro de observaciones personales
4. Conclusión
5. Ficha Bibliográfica



MARCO TEORICO
Materiales:
Caja Petri
Vaso de precipitados de 50 y 500 ml
Vidrio de reloj
Laminilla de cristal para reacciones inmunológicas
Pipeta de sally con manguera con boquilla
Pipeta volumétrica
Pipeta Pasteur
Probeta graduada de 100 ml
Bureta
Tubo de ensayo
Cristalizador
Espátula de metal con mango de madera.

Procedimiento:
Se va a llevar a cabo la actividad de pesar y medir los materiales de cristalería así como las sustancias, solventes, y otro tipo de reactivos que se soliciten.
Los materiales se colocarán en la balanza granataria para tomar sus pesos y se registrarán.
Una vez que ya se tenga el peso se les colocara a los materiales un reactivo cualquiera y se registrará el peso con el reactivo.

Al comenzar a tomar los pesos y medidas de todos los instrumentos sobre la balanza granataria, los fuimos colocando uno por uno y obtuvimos estos resultados:

Caja Petri: 71 gr.
Vaso de precipitados 50 ml: 28 gr.
Azúcar: 25.2 gr.
Vaso de precipitados 50 ml con azúcar: 53.2 gr.
Vidrio de reloj: 17.9 gr.
Laminilla de cristal para reacciones inmunológicas: 53.6 gr.
Vaso de precipitados de 500 ml: 116 gr.
Pipeta de sally con manguera con boquilla: 7.3 gr.
Pipeta graduada: 21.7 gr.
Pipeta volumétrica: 22.6 gr.
Pipeta Pasteur: 5.6 gr.
Probeta graduada de 100 ml: 145 gr.
Espátula de metal con mango de madera: 149.5 gr.
Pipeta graduada de 1 ml: 3.4 gr.
Agua destilada: 5.4 gr.
Vaso de precipitados 50 ml con agua destilada: 33.4 gr.
Tubo de ensayo: 8.6 gr.
Cristalizador: 55.4 gr.
Sal: 36.7 gr.
Cristalizador con sal: 92.1 gr.
Después de tener listos todos los pesos se realizará un pequeño ejercicio en el que se simulará que estamos sacando cantidad en gramos necesarios de agar para un medio de cultivo, utilizando la regla de tres.

Bitácora
Lunes 30-03-09
Tiempo Actividad
5 minutos Colocación de equipo de bioseguridad
50 minutos Toma de medidas de todos los materiales
5 minutos Apuntes
5 minutos Retirar equipo de bioseguridad

Recuadro de observaciones personales
En realidad si es por lógica que cuando ves un objeto por su tamaño más o menos, sabes cuanto va a pesar, sin embargo aquí las especulaciones no sirven ya que se requiere de pesos y medidas exactas para cualquier tipo de estudio que se llegue a realizar. Es por eso que debemos conocer el peso de todos los materiales de laboratorio.


CONCLUSION
Esta práctica fue sencilla y utilizaremos operaciones básicas, el sistema métrica decimal y la regla de tres. La última la empleamos al hacer una simulación con azúcar (como agar) para saber cuanto ocuparíamos para cinco cajas petri en un medio de cultivo.
Por otro lado primero pesamos todos los materiales de cristal que teníamos en la mesa y después colocamos en ellos, una sustancias; azúcar, sal y agua destilada para averiguar cuanto pesaban por si solos y juntos.
Fue una buena experiencia, aunque todavía nos falta aprender mucho más y a controlar nuestro pulso.

FICHA BIBLIOGRAFICA
1. Observaciones personales acerca de la práctica
2. Apuntes de laboratorio
3. Pesos de los materiales.

PROBLEMAS

Realizar problemas correspondientes a medios de cultivo (reactivo)
1. Anotar el nombre del medio de cultivo que se nos facilita, con todos los datos visibles en su etiqueta.
R= Base de agar Sangre
Datos:
Formula: Gramos por litro
Agar: 15.0
Cloruro de sodio: 5.0
Infusión de musculo cardiaco: 10.0
Preptona: 10.0

pH 7.3 +- 0.2
Registro No 0123R84 SSA
Contenido neto 450g
Lote No 5957123
Caducidad: 05/febrero/2007
Catálogo No 1031-A

2. Leer cuidadosamente las indicaciones que contiene el bote de medio de cultivo.
3. Rehidratar el contenido en gramos para 1000 ml, del cual deberá ocupar un porcentaje para Rehidratar en 250ml, 175ml y 138ml.

40g/x= 1000ml/250ml x= (40g)(250ml)/1000ml
X=10g
X=(40g)(175ml)/1000ml X= 7g
x= (40g) (138ml)/1000ml
X=5.52gr

4. Las operaciones deben de ser con números básicos como suma, resta, multiplicación, división para poder ejecutar la regla de tres.



Justificación
Realizamos este ejercicio para utilizar los SMD y SA y poder averiguar la cantidad de base agar sangre que ocupariamos de acuerdo al contenido que no siempre seria el mismo

Cámara de Neubauer

Sangre


Recuento de eritrocitos
Recuento de eritrocitos: ejemplo
Observe que en la grilla de la cámara de Neubauer las áreas de recuento de eritrocitos y linfocitos son diferentes. Los glóbulos rojos se cuentan en las áreas coloreadas de rojo, mientras que los glóbulos blancos se cuentan en las áreas coloreadas de azul. Ten en cuenta que la grilla central tiene 25 cuadrados de 1mm x 1mm de área y 0.10 mm de profundidad. El factor de dilución es por tanto de 1:200. Convierte el número de glóbulos rojos contados en 5 cuadrados a nº glóbulos rojos/µl. (1 µl (microlitro) = 1 mm3 )
Como se hace?




La imagen de abajo simula el campo que esta viendo al microscopio con un objetivo de 45x. Solo es visible el centro de la grilla. Intenta verificar esto al ir moviendo el campo de derecha-izquierda y de arriba-abajo, como si de una pletina de microscopio se tratase. Cuenta los glóbulos rojos en los cinco cuadrados mencionados anteriormente y determina el recuento de eritrocitos como se ha descrito anteriormente..
Muy importante: Cuando un eritrocito se sitúa en mitad de las líneas superior y/o de la izquierda, entonces es contabilizado. Pero no se contabiliza cuando se sitúa en mitad de las líneas inferior y/o de la derecha..
El rango normal de recuento de glóbulos rojos es el siguiente:
Mujeres: 3.9-5.6 millones/µl
Hombres: 4.5-6.5 millones/µl
Determine el recuento del sujeto cuya muestra aparece en la imagen.
Cual es la solución?



Técnicas de estudio de líneas celulares
TÉCNICAS DE CONTAJE CELULAR
Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas microscópicas dispersas en un fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de las células en la suspensión como el porcentaje de éstas que son viables.
Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde la relativamente simple cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre ellas la que empleamos (cámara de Neubauer), hasta equipos automáticos de contaje celular como el "Cell Coulter" de la empresa Beckman-Coulter.
El principio del contador celular se basa en la medida de los cambios en la resistencia eléctrica que se producen cuando una partícula no conductora en suspensión en un electrolito atraviesa un pequeño orificio. Como se puede ver en el esquema, una pequeña abertura entre los electrodos es la zona sensible a través de la que pasan las partículas que se encuentran en suspensión. Cuando una partícula atraviesa el orificio desplaza su propio volumen de electrolito. El volumen desplazado es medido como un pulso de voltaje. La altura de cada pulso es proporcional al volumen de la partícula. controlando la cantidad de la suspensión que circula a través del orificio es posible contar y medir el tamaño de las partículas. Es posible contar y medir varios miles de partículas por segundo, independientemente de su forma, color y densidad.
En la unidad de Citometría de flujo y Microscopia Confocal de los Servicios Científico-Técnicos de la Universidad de Barcelona se dispone de contadores celulares.
Sin embargo, es posible determinar la densidad celular empleando métodos más sencillos. Nos basta con una cámara de contaje celular, por ej. la cámara de Neubauer, y un microscopio. Una cámara de contaje celular es un dispositivo en el que se coloca una muestra de la suspensión a medir. El dispositivo presenta unas señales que determinan un volumen conocido (x microlitros). Al contar bajo el microscopio el número de partículas presentes en ese volumen se puede determinar la densidad de partículas en la suspensión de origen.
La cámara de Neubauer es una cámara de contaje adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos con una depresión en el centro, en el fondo de la cual se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrícula como la que se ve en la imagen. Es un cuadrado de 3 x 3 mm, con una separación entre dos lineas consecutivas de 0.25 mm. Así pues el área sombreada y marcada L corresponde a 1 milimetro cuadrado. La depresión central del cubreobjetos está hundida 0.1 mm respecto a la superficie, de forma que cuando se cubre con un cubreobjetos éste dista de la superficie marcada 0.1 milímetro, y el volumen comprendido entre la superficie L y el cubreobjetos es de 0.1 milímetro cúbico, es decir 0.1 microlitro.
Si contamos las cuatro áreas sombreada (L) observando un total de x células entre las cuatro áreas, la concentración en la suspensión celular será :
concentración en la suspensión (células / mL) = 10000 (x/4)
En la imagen puedes observar el aspecto de una de las regiones marcadas como L y que en el microscopio se ven como una cuadrícula de 16 pequeños cuadrados de 0.25 milímetros de lado. Esta imagen ha sido tomada empleando un microscopio invertido de contraste de fases.
Existen numerosos modelos de cámaras de contaje celular adaptadas a su uso en microscopía. En la imagen puedes observar una cámara de Neubauer doble, como las que usas en el laboratorio de prácticas.
Para determinar la viabilidad celular se emplean diferentes métodos. El más común es el de tinción con azul tripán. El azul tripán es un coloide que se introduce en el interior de las células que presentan roturas en la membrana. Así pues las células que aparecen en la imagen, claramente de color azul, son consideradas no viables. Asimilar células blancas, por exclusión, a células viables es un error pues por este método se sobrevalora la viabilidad de las células en la suspensión, determinando como inviables sólo aquellas con la membrana rota. Existen otros métodos de determinación de la viabilidad celular como el más preciso de la tinción con ioduro de propidio

En la red dispones de descripciones detalladas sobre como utilizar un hemocitómetro, como la propuesta por P.J. Hansen, o la detallada descripción que aporta Beckton-Dickinson, y los problemas de cálculo de parámetros celulares que plantea empleando datos obtenidos a partir de un hemocitómetro, y otros protocolos para el contaje de células (en protocol-online)
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Material docente diseñado y elaborado por Manuel Reina. Última actualización : . Comentarios : mreina@ub.edu




Se aseptiza el dedo con alcohol y luego se seca al aire o con algodón. Se coge entre el pulgar y el índice y se hace una punción rápida y penetrante a través de la piel de la punta del dedo con una lanceta estéril.
2. Se deshecha la primera gota de sangre y se aspira la siguiente con la pipeta de dilución perfectamente limpia y seca hasta la señal 1 o 0.5 (también puede utilizarse la pipeta de hemoglobina, de 20 microlitros). Hay que evitar la entrada de burbujas de aire, pudiendo ayudarnos de un papel de filtro para conseguir el enrasado.
3. A continuación se toma con la pipeta líquido de Hayem, isotónico con la sangre, hasta la señal 1; así, la sangre queda diluida al 1/10, si tomamos sangre hasta la señal 1, o al 1/20 si tomamos hasta 0.5. Esto es así porque el volumen de la bola de la pipeta es 100 veces superior al del capilar de la misma. (Si hemos utilizado la pipeta de hemoglobina podemos diluir su contenido en 2 o 4 ml de líquido de Hayem para obtener diluciones 1/100 o 1/200).
4. Tomamos la pipeta (o el tubo de ensayo) entre los dedos índice y pulgar y agitamos. A través de la goma de conexión con la pipeta, soplamos para despreciar las primeras gotas por corresponder al líquido que estaba en el capilar.
5. Se adapta un cubreobjetos sobre una cámara cuentaglóbulos limpia y seca y se coloca una gota en uno de los lados del cubre; esta gota penetra por capilaridad y rellena el retículo de la misma.
6. Una vez preparada la cámara se coloca sobre la platina del microscopio dejándose unos minutos en reposo para que sedimenten los glóbulos. Disponemos el condensador bajo y luz débil; enfocamos primero con el objetivo débil seco y luego se cambia al fuerte seco para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los cuadrados pequeños del retículo marcado en color rojo. Finalizado el recuento se procede a la limpieza de la pipeta con acético 1:3, agua destilada y alcohol-éter sucesivamente.
7.El volumen de sangre en el cual se han contado las células resulta de multiplicar la profundidad de la cámara por el factor de dilución, la superficie de los cuadrados y el número de cuadrados contados.
Con cámara de NEUBAUER: Superficie de 1 cuadrado grande (1/20 mm de lado):

Volumen de un cuadrado grande (1/10 mm de profundidad):

Si contamos "a" glóbulos rojos en "n" cuadrados pequeños, el número de glóbulos por cuadrado será a/n.
Si en un volumen 1/4000 mm3 hay a/n glóbulos rojos, en 1 mm3 habrá X. Luego:

siendo X el número de glóbulos rojos existentes por cada mm3 de sangre diluida.
Si la sangre se diluyó a 1/100 o 1/200, habrá que multiplicar el valor X por 100 o 200 respectivamente, con lo cual obtendremos un nuevo valor, Y, que representa el número de glóbulos rojos existentes por cada mm3 de sangre (sin diluir).


Se utilizan para calcular, mediante el uso del microscopio, el número de partículas (leucocitos, hematíes, bacterias…) por unidad de volumen de un líquido.
La cámara está constituida por una placa base de vidrio especial parecido a un porta, su parte central se encuentra separada de los extremos por unas ranuras. En ella se encuentran las cuadrículas de recuento.
La fórmula de contaje es: partículas/mm3= partículas contadas.
Clases de cámaras:
- Neubauer improved: Es el más utilizado (9 cuadros grandes, cada 1 de 1 mm2.)
- Neubauer: La diferencia es el cuadro grande central.
- Thoma: Se utiliza solo para el recuento de eritrocitos.
- Fuchs-Rosenthal: Se utiliza habitualmente para recuento de células en líquidos orgánicos (LCR, Líquido sinovial…)

Justificación
Es de suma importancia que conozcamos el funcionamiento de la cámara de neubauer ya que la utilizaremos mucho en esta especialidad más adelante en hematología

pruebas de serologia

Pruebas serológicas
Es un examen del líquido seroso del líquido de la sangre (suero, el líquido transparente que se separa cuando la sangre se coagula) que se utiliza para detectar la presencia de anticuerpos contra un microorganismo.
Las pruebas serológicas son de dos tipos:
•no treponémicas
•Treponémicas.
Las pruebas no-treponémicas incluyen VDRL, RPR, USR y TRUST, de estas las mas usadas son VDRL y RPR. Estas pruebas son utilizadas para despistaje, son económicas y también sirven para evaluar la eficacia del tratamiento.
Las pruebas treponémicas se utilizan para verificar cuando las pruebas no-treponémicas son reactivos o como pruebas confirmatorias cuando el cuadro clínico es sugestivo, pero la serología es negativa.

REACCIONES FEBRILES
Las reacciones febriles (RF) son pruebas serológicas que se han empleado para diagnosticar tifoidea, paratifoidea, ricketsiosis, y brucelosis.
En las reacciones febriles se detectan anticuerpos en el suero del paciente contra: salmonella, Brucella, y Rickettsia.

VDRL
Es un examen de tamizaje para sífilis que mide los anticuerpos llamados reaginas, que pueden ser producidos por el Treponema pallidum, la bacteria causante de dicha enfermedad. Sin embargo, el cuerpo no siempre produce reagina específicamente en respuesta a la bacteria de la sífilis, por lo que el examen no siempre es preciso.

Prueba de embarazo
Es una prueba que mide una hormona llamada gonadotropina corionica humana (GCH), producida durante el embarazo.
Esta hormona aparece en la sangre y en la orina de las mujeres embarazadas hasta 10 días después de la concepción.

Vista de la cebolla enfocada en el microscopio

camara de nuebauer. mucroscopio enfoqe

cámara de neubauer en microscopio enfocado
Mis observaciones